Beliggende i Toledo Franciskaner klosteret San Juan de Los Reyes er en af de vigtigste attraktioner i byen, og en af dens mest majestætiske og smukke bygninger. Dette kloster blev grundlagt af kong Ferdinand af Aragonien og Dronning Isabella af Castilien til ære for fødslen af deres barn, samt for at fejre sejren over styrker af portugisisk i kampen Toro.

Opførelsen af klostret blev påbegyndt af arkitekten Juan Guasa i 1477 og varede i flere årtier. Den vigtigste del af bygningen blev afsluttet i 1506. De vigtigste indgangen til klostret, der er designet af den berømte arkitekt Alonso Covarrubias, blev bygget i 1553. På det oprindelige forslag, blev det antaget, at klostret vil være en Kongelig grav. Men så er det så sket, at Isabella og Ferdinand blev begravet i et befriet Granada.

Klosteret San Juan de Los Reyes er et eksempel på optimering af den Gotiske periode med den iboende elementer i Mudéjar-stil. Kirken har et latinsk kors plan. Bygningens indre er en imponerende udsmykning og indretning. Væggene er dekoreret med billeder af ørne og emblemer for de Kongelige dynasti, der ligger i den øvre galleri, et hvælvet loft, der er dekoreret med smukke ornamenter i arabisk stil. Et ægte kunstværk er hovedalteret, anlagt i det 16 århundrede af billedhuggeren Felipe Bharni og malerier af scener af Kristi lidelse og Opstandelse, udført af kunstneren Francisco de Comentam. Særlig opmærksomhed fortjener det flot kloster, der blev afsluttet i 1504 og betragtes som en sand arkitektonisk mesterværk af den sengotiske periode.