Uffizi-er en af de mest berømte kunstmuseer i verden. Her præsenterer et stort panorama af forskellige skoler maleri. Denne Florentinske skole, og Venedig og andre italienske skoler, samt en stor samling af Flamske malerier fra kendte serie af selvportrætter. Ud over malerier i galleriet, der er dedikeret til antik skulptur og værelser med gobeliner.

Bygningen af Uffizi-galleriet blev bygget af arkitekt Giorgio Vasari, som er bestilt af Medici-familien og var oprindelig beregnet til administrative formål. Startede byggeriet var i 1560 og endte 20 år senere.

Bygningen består af to bygninger med loggiaer i stueetagen. I dybden af begge bygninger er forbundet af en tredje bygning med en stor arkade, med udsigt over bredden af floden Arno. I bunden, på begge sider af den Centrale gårdhave til en stærk, pyloner dannet nicher, som er placeret statuer af det nittende århundrede, der skildrer berømte figurer af Toscana. Den anden sal er skåret igennem de store Vinduer, og den tredje er en stor loggia. I tillæg til det galleri, som indtager tredje sal, den bygning huser den Statslige arkiver, hvor sjældne dokumenter om byens historie, og Kabinettet af tegninger og grafik, hvor en unik kollektion, der blev lanceret i det XVII århundrede på initiativ af kardinal Leopold de Medici.

Da 1737, Museet blev folkets ejendom, efter Anna Maria Luisa - den sidste repræsentant for Medici-familien - gav det som en gave til byen.

Museets samling er placeret på den øverste etage af bygningen. Græske og Romerske skulpturer er udstillet i den rummelige korridorer. Malerier er hængt op i kronologisk rækkefølge, hvilket gør det muligt at spore udviklingen af Florentinske kunst fra den Byzantinske periode og den Høje Renæssancen og senere.